புதிய தொழில்நுட்பத்தின் முழு தானியங்கி நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் கண்டறிதல் இயந்திரம்

ஐந்து பலம்:
● நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிக்கப்பட்ட படியுடன் உள்ளமைக்கப்பட்ட கருவி
● அல்ட்ராசோனிக் பிரித்தெடுத்தல் தொகுதியுடன் உள்ளமைக்கப்பட்ட கருவி
● முழு தானியங்கி முறையில் உள்ளமைக்கப்பட்ட கருவி
● மாறி வெப்பநிலை பெருக்கத்துடன் உள்ளமைக்கப்பட்ட கருவி
● முழுமையாக மூடப்பட்ட ரியாஜென்ட் கிட் மூலம் உள்ளமைக்கப்பட்ட கருவி

1.நியூக்ளிக் அமிலம் கண்டறிதல் எதிர்வினைகள் பிரித்தெடுக்கப்பட்டு சுத்திகரிக்கப்பட வேண்டுமா?
நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கண்டறிவதற்கான கொள்கை பின்வருமாறு: ப்ரைமரின் செயல்பாட்டின் கீழ், டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ டெம்ப்ளேட்டில் சங்கிலி எதிர்வினை பெருக்கத்தைச் செய்ய டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் பயன்படுத்தப்படுகிறது (என்ஏவின் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் தேவைப்படுகிறது), பின்னர் வெளியிடப்பட்ட ஒளிரும் சமிக்ஞையின் அளவு கண்டறியப்படுகிறது. மாதிரியில் கண்டறியப்பட வேண்டிய நோய்க்கிருமியின் நியூக்ளிக் அமிலம் (டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ) உள்ளதா.

1) பிரித்தெடுக்கப்படாத அல்லது சுத்திகரிக்கப்படாத மாதிரிகள் இறுதி முடிவைப் பாதிக்கும் பல கூறுகளைக் கொண்டிருக்கலாம்: நியூக்லீஸ் (இது இலக்கு நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கரைத்து தவறான எதிர்மறையை ஏற்படுத்தும்), புரோட்டீஸ் (டிஎன்ஏ பாலிமரேஸைக் குறைத்து தவறான எதிர்மறையை ஏற்படுத்தும்), ஹெவி மெட்டல் உப்பு (இது சின்தேஸை செயலிழக்கச் செய்து தவறான நேர்மறையை ஏற்படுத்துகிறது), அதிக அமிலத்தன்மை அல்லது அதிக காரத்தன்மை கொண்ட PH (இது எதிர்வினை தோல்வியடையக்கூடும்), முழுமையற்ற RNA (தவறான எதிர்மறை தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் தோல்விக்கு வழிவகுக்கும்).

2) சில மாதிரிகள் நேரடியாகப் பெருக்குவது கடினம்: கிராம்-பாசிட்டிவ் மற்றும் சில ஒட்டுண்ணிகள், அவற்றின் தடிமனான செல் சுவர்கள் மற்றும் பிற கட்டமைப்புகள் காரணமாக, அவை நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு செயல்முறைக்கு செல்லவில்லை என்றால், பிரித்தெடுத்தல் இல்லாத கிட் தோல்வியடையும். மாதிரிகள்.

எனவே, நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் படியுடன் கட்டமைக்கப்பட்ட சோதனைக் கருவி அல்லது கருவியைத் தேர்ந்தெடுக்க பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.

2. இரசாயன பிரித்தெடுத்தல் அல்லது உடல் மீயொலி துண்டு துண்டாக பிரித்தெடுத்தல்?
பொதுவாக, இரசாயன பிரித்தெடுத்தல் பெரும்பாலான முன் சிகிச்சை மற்றும் சுத்திகரிப்புக்கு பயன்படுத்தப்படலாம்.இருப்பினும், தடிமனான சுவர் கொண்ட கிராம்-பாசிட்டிவ் பாக்டீரியா மற்றும் சில ஒட்டுண்ணிகளில், இரசாயனப் பிரித்தெடுத்தல் பயனுள்ள நியூக்ளிக் அமில வார்ப்புருக்களைப் பெற முடியாது, இதன் விளைவாக தவறான எதிர்மறை கண்டறிதல் ஏற்படுகிறது.கூடுதலாக, இரசாயன பிரித்தெடுத்தல் பெரும்பாலும் வலுவான முகவர்களைப் பயன்படுத்துகிறது, நீக்குதல் முழுமையாக இல்லாவிட்டால், எதிர்வினை அமைப்பில் வலுவான காரத்தை அறிமுகப்படுத்துவது எளிது, இதன் விளைவாக தவறான முடிவுகள் ஏற்படும்.

மீயொலி துண்டு துண்டானது உடல் நசுக்குதலைப் பயன்படுத்துகிறது, இது மனித பயன்பாட்டிற்கான POCT துறையில் முன்னணி நிறுவனமான GeneXpert ஆல் வெற்றிகரமாகப் பயன்படுத்தப்பட்டது, மேலும் சில சிக்கலான மாதிரிகளின் (மைக்கோபாக்டீரியம் காசநோய் போன்றவை) நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதில் ஒரு முழுமையான நன்மை உள்ளது.

எனவே, நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் படியுடன் கட்டமைக்கப்பட்ட சோதனைக் கருவி அல்லது கருவியைத் தேர்ந்தெடுக்க பரிந்துரைக்கப்படுகிறது.மற்றும் மீயொலி பிரித்தெடுத்தல் தொகுதி இருந்தால் அது உகந்ததாகும்.

3. கையேடு , அரை தானியங்கி மற்றும் முழு தானியங்கி?
இது தொழிலாளர் செலவு மற்றும் வேலை திறன் ஆகியவற்றின் பிரச்சினை.தற்போது, ​​போதுமான பணியாளர்கள் இல்லாத செல்லப்பிராணி மருத்துவமனைகள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் கண்டறிதல் ஆகியவை சில திறன்களும் அனுபவமும் தேவைப்படும் ஒரு வேலையாகும்.முழு தானியங்கி நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் கண்டறிதல் இயந்திரம் சரியான தேர்வு என்பதில் சந்தேகமில்லை.

4. நிலையான வெப்பநிலை பெருக்கம் அல்லது மாறி வெப்பநிலை பெருக்கம்?
பெருக்க எதிர்வினை என்பது நியூக்ளிக் அமிலத்தைக் கண்டறியும் இணைப்பாகும், மேலும் இந்த இணைப்பில் உள்ள தொழில்முறை தொழில்நுட்பம் சிக்கலானது.தோராயமாகச் சொன்னால், நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பெருக்க என்சைம்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.பெருக்கச் செயல்பாட்டில், பெருக்கப்பட்ட ஒளிரும் சமிக்ஞை அல்லது உட்பொதிக்கப்பட்ட ஒளிரும் சமிக்ஞை கண்டறியப்படுகிறது.பொதுவாகச் சொன்னால், ஃப்ளோரசன்ஸ் சிக்னல் எவ்வளவு முன்னதாகத் தோன்றுகிறதோ, அந்த மாதிரியின் இலக்கு மரபணு உள்ளடக்கம் அதிகமாகும்.

நிலையான வெப்பநிலை பெருக்கம் என்பது ஒரு நிலையான வெப்பநிலையில் ஒரு நியூக்ளிக் அமிலம் பெருக்கமாகும், அதே சமயம் மாறி வெப்பநிலை பெருக்கம் என்பது ஒரு சுழற்சி பெருக்கமாகும், இது கண்டிப்பாக டினாடரேஷன்-அனீலிங்-நீட்டிப்புக்கு ஏற்ப உள்ளது.நிலையான வெப்பநிலை பெருக்க நேரம் மேற்கொள்ளப்படுகிறது, அதே நேரத்தில் மாறி வெப்பநிலை பெருக்க நேரம் கருவியின் வெப்பநிலை உயர்வு மற்றும் வீழ்ச்சியின் விகிதத்தால் பெரிதும் பாதிக்கப்படுகிறது (தற்போது, ​​​​பல உற்பத்தியாளர்கள் சுமார் 30 நிமிடங்களில் 40 சுழற்சிகளைப் பெருக்க முடிகிறது).

ஆய்வக நிலைமைகள் நன்றாகவும், மண்டலம் கண்டிப்பாகவும் இருந்தால், இரண்டிற்கும் இடையேயான துல்லிய வேறுபாடு பெரிதாக இருக்காது என்று சொல்வது நியாயமானது.இருப்பினும், மாறி வெப்பநிலை பெருக்கமானது அதிக நியூக்ளிக் அமில தயாரிப்புகளை ஒப்பீட்டளவில் குறுகிய காலத்தில் ஒருங்கிணைக்கும்.கடுமையான மண்டலம் மற்றும் தொழில்முறை பயிற்சி பணியாளர்கள் இல்லாத ஆய்வகங்களுக்கு, நியூக்ளிக் அமிலம் ஏரோசல் கசிவு ஏற்படும் அபாயம் அதிகமாக இருக்கும், கசிவு ஏற்பட்டவுடன் தவறான நேர்மறை ஏற்படுகிறது, மேலும் அதை அகற்றுவது மிகவும் கடினம்.

கூடுதலாக, மாதிரி சிக்கலானதாக இருக்கும் போது நிலையான வெப்பநிலை பெருக்கமானது குறிப்பிட்ட அல்லாத பெருக்கத்திற்கு அதிக வாய்ப்புள்ளது (ஒப்பீட்டு எதிர்வினை வெப்பநிலை குறைவாக உள்ளது, மேலும் நீட்டிப்பு வெப்பநிலை அதிகமாக இருந்தால், ப்ரைமர் பிணைப்பு விவரம் சிறந்தது).

தற்போதைய தொழில்நுட்பத்தைப் பொறுத்தவரை, மாறி வெப்பநிலை பெருக்கம் மிகவும் நம்பகமானது.

5. நியூக்ளிக் அமிலம் பெருக்கும் பொருட்களின் கசிவு அபாயத்தைத் தவிர்ப்பது எப்படி?
தற்போது, ​​பல உற்பத்தியாளர்கள் சுரப்பி வகை பிசிஆர் குழாயை நியூக்ளிக் அமில எதிர்வினைக் குழாயாகத் தேர்வு செய்கிறார்கள், இது உராய்வு மூலம் அடைக்கப்படுகிறது, மேலும் மாறி வெப்பநிலை பிசிஆர் பெருக்கத்தில் மாறி வெப்பநிலை டினாட்டரேஷன் 90 டிகிரியை அடைகிறது.
சென்டிகிரேட்.வெப்பத்துடன் மீண்டும் மீண்டும் விரிவடையும் செயல்முறை மற்றும் குளிர்ச்சியுடன் சுருங்குவது PCR குழாயின் சீல் செய்வதற்கு பெரும் சவாலாக உள்ளது, மேலும் சுரப்பி வகை PCR குழாய் கசிவை ஏற்படுத்துவது ஒப்பீட்டளவில் எளிதானது.

எதிர்வினை தயாரிப்பின் கசிவைத் தவிர்க்க முற்றிலும் சீல் செய்யப்பட்ட கிட்/டியூப் மூலம் எதிர்வினையைப் பின்பற்றுவது விரும்பத்தக்கது.நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதற்கும் கண்டறிவதற்கும் முழுமையாக சீல் செய்யப்பட்ட கருவி இருந்தால் அது சரியானதாக இருக்கும்.

எனவே நியூ டெக்கின் புதிய முழு தானியங்கி நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் கண்டறிதல் இயந்திரம் மேற்கண்ட ஐந்து உகந்த தேர்வுகளைக் கொண்டுள்ளது.